微生物實驗入門和普通微生物學實驗(二版)

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圖書描述

本書包含九大部分,幾乎提及所有普通微生物實驗的資料,其內容從基本的微生物實驗室及顯微鏡的瞭解、微生物實驗入門、染色法、微生物的分離、純係化及計數,進而討論微生物的生長、控製及代謝作用,並做水的採樣、水中總菌落數、大腸桿菌群、糞便大腸桿菌群及大腸桿菌的敘述與實驗。最後,更將實驗所需的試驗試劑、染色試劑及培養基也載入於附錄中。

  其九大部分包括:

  第一部分-「瞭解微生物實驗室」:介紹安全守則、常用的器材及設備與無菌操作技術等。

  第二部分-「微生物實驗入門」:介紹微生物實驗室基本設備及器材的滅菌操作法、培養基的配製及培養物的處理、微生物的分離、純係化及增值法。最後,討論微生物菌種貯存法。

  第三部分-「顯微鏡」:主要是指導實驗者瞭解顯微鏡的構造、如何校正測微器及如何使用測微器測量生物之大小。

  第四部分-「染色法」:讓實驗者練習大部分的微生物染色法。

  第五部分-「微生物的分離、純化技術及計數」:告知實驗者如何採取樣品、將樣品稀釋及如何使微生物從培養基或濾膜上生長齣來,並如何計數所生長的微生物。

  第六部分-「微生物的生長及控製」:討論微生物生長受到哪些因子的影響與如何利用化學及物理的方法控製微生物的生長。

  第七部分-「微生物的代謝作用」:討論微生物對碳水化閤物、蛋白質及脂質的代謝情形。

  第八部分-「水中微生物測定」:討論一般代檢驗機構經常申請的項目,如:水中總菌落數、大腸桿菌群、糞便大腸桿菌群及大腸桿菌等,並強調微生物實驗的品保品質規範。

  第九部分-「附錄1的試劑試驗」、「附錄2的染色試劑」、「附錄3的培養基」。

  本書參考國內外眾多微生物及微生物實驗之相關書籍,書中所設計的實驗,皆是普通微生物學實用且必要的實驗,對大專院校相關領域的師生而言,是一本值得參考應用的工具書。
 
《分子生物學技術:從基礎到前沿應用》 內容簡介 本書旨在為生命科學、生物技術、醫學研究等領域的科研人員、高年級本科生及研究生提供一本全麵、深入且兼具實用性的分子生物學技術參考手冊。我們深知,在當前的生物學研究中,掌握可靠、高效的分子生物學技術是取得突破性成果的關鍵。本書摒棄瞭對基礎微生物學理論的冗長闡述,而是將重點完全聚焦於那些支撐現代生命科學研究的核心操作流程、原理剖析與技術優化策略。 本書結構清晰,內容涵蓋瞭分子生物學領域內最具代錶性和應用價值的實驗技術,並以詳盡的實驗步驟、故障排除指南和前沿進展介紹為特色。 第一部分:核酸操作的基石與優化 本部分係統梳理瞭從核酸提取到定量分析的整個流程,確保讀者能夠精確、高純度地獲取實驗所需的模闆。 第一章:高質量核酸的獲取與純化 詳細闡述瞭不同來源(哺乳動物組織、植物組織、細菌、病毒)的DNA和RNA的提取方法。重點對比瞭酚氯仿抽提法、矽膠柱法和磁珠法的優缺點,並提供瞭針對高黏度樣本和低豐度樣本的優化方案。特彆關注瞭RNase汙染的預防與處理,確保RNA的完整性。同時,深入解析瞭核酸純度的評估標準(如Nanodrop A260/280和A260/230比值)及其對下遊反應的影響。 第二章:PCR及其衍生技術的精細控製 本章是全書的重點之一,詳細講解瞭標準聚閤酶鏈式反應(PCR)的反應體係組分、熱循環參數的精確設定,以及如何通過優化引物設計(Tm值計算、二級結構預測)來提高特異性和擴增效率。 定量PCR (qPCR) 與數字PCR (dPCR): 深入探討瞭熒光定量PCR的幾種主要模式(TaqMan探針、SYBR Green染料法),包括標準麯綫的建立、熔解麯綫分析的應用。對於dPCR,本書剖析瞭其絕對定量的優勢、微流控芯片與滴式反應池的設計原理,以及如何利用dPCR解決傳統qPCR在低拷貝數樣本中的局限性。 高保真PCR與反轉錄PCR (RT-PCR): 介紹瞭具有校對功能的DNA聚閤酶的應用,以及一次性反轉錄PCR(One-Step RT-PCR)與兩步法(Two-Step RT-PCR)在mRNA或lncRNA分析中的應用差異。 第二部分:基因組編輯與重組技術 本部分著眼於對遺傳物質進行精確修改和構建重組分子的前沿技術,是現代生物學研究不可或缺的工具。 第三章:限製性內切酶與分子剋隆的藝術 詳盡介紹瞭各類限製性內切酶的識彆位點、切割特性(平末端、粘性末端)。著重講解瞭分子剋隆的“黃金標準”——粘性末端連接法,包括粘性末端配對、T4 DNA連接酶的優化條件。同時,引入瞭高效的替代方法,如TOPO剋隆技術和Gibson組裝技術,特彆是在多片段DNA的無縫連接中的應用。 第四章:CRISPR/Cas9係統的原理與實踐 全麵解析瞭CRISPR/Cas9係統的作用機製,包括sgRNA的設計原則(脫靶效應預測與規避)、Cas9核酸酶的類型選擇(SpCas9、Cas12a等)。本書提供瞭詳細的細胞係和動物模型中基因編輯的指南,包括sgRNA的體外轉錄、脂質體轉染/電穿孔遞送策略,以及如何利用T7核酸酶I消化法或高通量測序驗證基因編輯效率。此外,還涵蓋瞭堿基編輯(Base Editing)和先導編輯(Prime Editing)等下一代無缺口編輯技術的原理與操作要點。 第三部分:蛋白質分析與相互作用研究 本部分專注於蛋白質的提取、分離、鑒定及其在復雜體係中的功能分析。 第五章:蛋白質的提取、分離與定量 深入探討瞭從細胞裂解到蛋白質純化的全流程。重點講解瞭不同裂解緩衝液(溫和型、強力型)的選擇依據,以及蛋白酶抑製劑雞尾酒的閤理配製。在分離技術方麵,詳細剖析瞭SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)的原理、膠的配製,以及Western Blotting(免疫印跡)中抗體選擇、封閉條件和顯影技術的關鍵控製點。此外,還介紹瞭基於離子交換和疏水作用的蛋白質層析純化技術。 第六章:蛋白質相互作用與結構解析 本章麵嚮復雜生物學問題的解決。詳細闡述瞭酵母雙雜交(Y2H)係統構建、篩選及假陽性排除策略。對於體內相互作用研究,著重介紹瞭免疫共沉澱(Co-IP)實驗的抗體選擇、洗脫條件,以及後續的質譜聯用鑒定(IP-MS)的流程設計。對於蛋白質的體內定位研究,則詳細說明瞭綠色熒光蛋白(GFP)融閤標簽的構建與共聚焦顯微鏡觀察的技術規範。 第四部分:高通量測序文庫製備與生物信息學基礎 麵對大數據時代的挑戰,本書引入瞭現代測序技術對分子生物學研究的賦能,並提供瞭入門級的分析指導。 第七章:RNA測序(RNA-seq)文庫的構建 詳細對比瞭基於Poly-A富集法和基於rRNA去除法的RNA-seq文庫構建流程,並提供瞭處理降解RNA樣本(如FFPE樣本)的特殊文庫製備策略。對cDNA閤成、接頭連接(Adapter Ligation)的效率優化進行瞭深入分析。 第八章:測序數據的基礎分析流程 本章並非深入的生物信息學教程,而是側重於實驗人員應具備的“數據解讀能力”。介紹瞭FASTQ文件質量評估(使用FastQC)、序列比對(如使用STAR或HISAT2)、以及差異錶達基因(DEG)分析的基本流程和常用統計工具(如DESeq2, edgeR)的參數解讀。旨在幫助科研人員有效銜接實驗操作與生物信息學結果。 本書特色 本書的撰寫嚴格遵循“實驗操作為導嚮”的原則,所有技術點均配有詳細的“操作要點”和“常見問題與解決方案”專欄,確保實驗結果的可重復性和高成功率。我們避免瞭對基礎微生物學概念的重復講解,而是聚焦於技術層麵的深度挖掘與創新應用,是分子生物學實驗人員案頭不可或缺的實用工具書。

著者信息

圖書目錄

再版序 i
再序 ii
編著者序 iii

第一部  瞭解微生物實驗室  1
第1章 實驗室安全守則 3
第2章 實驗室常用的器材及設備 7
第3章 實驗室設備的使用及滅菌技術 11
壹、高壓滅菌釜 11
貳、乾熱滅菌箱 12
參、恆溫培養箱 13
肆、恆溫水浴槽 14
伍、無菌操作颱 14
陸、無菌過濾法 16
柒、培養基的滅菌法 19
捌、塑膠及玻璃器皿的滅菌法 20
玖、培養物的處理 21
第4章 微生物實驗室品保品管規範 23
壹、儀器設備 23
貳、實驗室一般操作 26
參、採樣、運送與貯存 29

第二部  微生物實驗入門  31
第5章 微生物實驗室基本設備及器材的滅菌操作法 33
第6章 培養基的配置、貯存及培養物的處理 43
第7章 微生物的分離、純係化及增殖法 55
第8章 微生物菌種貯存法 65

第三部  顯微鏡  71
第9章 顯微鏡的構造 73
第10章 雙眼顯微鏡的使用及維護 75
第11章 測微器的使用 79
第12章 細菌鞭毛的運動性測定 83
第13章 黴菌菌絲計數法 89
第14章 酵母菌大小測定 95

第四部  染色法  101
第15章 簡單染色法 103
第16章 負染色法 109
第17章 內孢子染色法 113
第18章 莢膜染色法 119
第19章 鞭毛染色法 123
第20章 抗酸性染色法 129
第21章 革蘭氏染色法 135

第五部  微生物的分離、純係化及計數  141
第22章 培養基的種類及配製 143
一、培養基的定義 143
二、培養基的種類 143
三、培養基的配製 144
第23章 樣品的採取及稀釋法 151
一、樣品採取的重要性 151
二、樣品採取應注意事項 151
三、樣品的採取及樣品運送 153
四、樣品的接受及稀釋 153
第24章 微生物的分離及接種法 161
一、微生物的分離 161
二、微生物的接種 162
三、微生物的培養 162
第25章 好氣總菌落數之計數法 171
一、檢體處理 173
二、檢驗的方法 173
(一)過濾法 173
(二)塗抹法 174
(三)混稀倒皿法 175
(四)培養基盤膜測定法 175
第26章 黴菌及酵母菌的計數 181
一、黴菌的計數 183
二、酵母菌的計數 183

第六部  微生物的生長及控製  187
第27章 微生物的生長 189
一、氧氣對微生物生長的影響 189
二、溫度對微生物生長的影響 189
三、滲透壓對微生物生長的影響 190
四、酸鹼值對微生物生長的影響 190
第28章 微生物生長的控製-物理方法 197
一、溫度 197
二、放射綫 197
三、滲透壓 198
四、過濾 198
五、乾燥 198
六、超音波 199
第29章 微生物生長的控製-化學方法 209
一、防腐劑及消毒劑對微生物生長的影響 209
二、金屬對微生物生長的影響 209
三、動植物體內天然防腐劑對微生物生長的影響 209
四、抗生素對微生物生長的影響 210

第七部  微生物的代謝作用  217
第30章 碳水化閤物的代謝 219
一、澱粉水解試驗 219
二、碳水化閤物的醱酵試驗 219
三、甲基紅試驗 221
四、歐普試驗 221
第31章 蛋白質的分解 229
一、明膠的水解作用 229
二、酪蛋白的水解作用 230
三、吲哚(Indole)的形成 230
四、硫化氫(H2S)之形成 230
五、胺基酸的脫氨基作用 231
六、胺基酸的脫羧作用 231
第32章 脂質的水解 239
一、亮藍三丁酸酯的水解作用 241
二、亮藍橄欖油洋菜培養基的水解作用 242
三、亮藍Tween-80的水解作用 242

第八部  水中微生物的測定  245
第33章 微生物檢測用水樣的採樣與貯存 247
第34章 水中總菌落數之測定-濾膜法 261
第35章 水中總菌落數之測定-塗抹法 267
第36章 水中總菌落數之測定-混稀法 273
第37章 水中總大腸桿菌群之測定-多管醱酵法 279
第38章 水中大腸桿菌群之測定-濾膜法 287
第39章 水中糞便大腸桿菌群之測定-多管醱酵法 293
第40章 水中大腸桿菌群之測定-多管醱酵法 301

參考文獻 311
附錄1:試驗試劑 313
附錄2:染色試劑 317
附錄3:培養基

圖書序言

序

  此次新增第二部微生物實驗入門的內容包括: 第5章的微生物實驗室基本設備及器材的滅菌操作法,提醒於基本設備中如何除去不必要影響目的微生物生長的因素。第6章培養基的配製、貯存及培養物的處理,告知影響目的微生物生長良好的培養基配製法,並提醒實驗者需如何纔能配製成功的培養基。如何貯存無水培養基,避免培養基的貯存不良,造成培養基的凝固而浪費金錢。培養物如何處理纔可避免造成汙染及危害實驗室的工作人員。第7章微生物的分離、純化及增殖法,提醒實驗者對於分離、純化及繁殖時應注意的事項,避免增殖到不純的菌株,引起汙染菌對實驗造成數據的影響。第8章微生物菌種貯存法,辛苦的純化分離齣目的微生物,若無法適當貯存而導緻目的微生物死亡,或記錄不詳緻使無法找齣需要的目的微生物,這是實驗研究中最不幸的事。

圖書試讀

用户评价

评分☆☆☆☆☆

我購買《微生物實驗入門和普通微生物學實驗(二版)》這本書,主要是被其“入門”和“實用”這兩個詞所吸引。果然,它沒有讓我失望。書中的語言通俗易懂,避免瞭過多的專業術語,即使是初學者也能夠輕鬆理解。它更像是一位循循善誘的老師,一步一步地引導我們走進微生物的世界。我特彆喜歡書中關於“注意事項”和“常見錯誤分析”的部分,這些內容往往是教科書中容易被忽略的,但對於實際操作來說卻至關重要。它提前為我們指齣瞭可能遇到的“坑”,讓我們能夠避免重復犯錯。我曾經在進行微生物計數實驗時,因為沒有仔細閱讀這部分內容,導緻結果偏低,後來查閱瞭書中關於“空氣汙染”的注意事項,纔恍然大悟。書中還提供瞭許多實驗室的安全指南,讓我在實驗過程中能夠安心操作。總的來說,這本書是一本非常適閤初學者入門的書籍,它不僅傳授瞭實驗技能,更培養瞭我們嚴謹的科學態度和解決問題的能力,是一本值得反復閱讀和參考的優秀教材。

评分☆☆☆☆☆

我必須說,《微生物實驗入門和普通微生物學實驗(二版)》這本書的編排方式非常人性化。對於我這樣一個習慣於快速查找信息的人來說,它清晰的目錄和索引設計極大地節省瞭我的時間。我可以在需要時迅速找到特定的實驗或者概念。書中在介紹每個實驗時,都會先給齣一個簡要的概述,然後是詳細的操作步驟,最後是對實驗結果的預期和可能的討論。這種結構非常清晰,能夠幫助我快速掌握實驗的整體流程和要點。我個人比較喜歡書中關於“質量控製”方麵的介紹,它提醒我們在進行實驗時要注意哪些環節,以保證實驗結果的準確性和可靠性。而且,書中對於各種微生物的染色方法,比如革蘭氏染色、亞甲基藍染色等,都講解得非常細緻,並且提供瞭不同菌種在染色後的典型形態描述,這對於我們初期識彆和區分細菌非常有幫助。我曾經在分離未知菌時,通過書中的圖文對照,能夠初步判斷齣它屬於革蘭氏陽性還是陰性,以及大緻的細胞形態,這為後續的鑒定打下瞭基礎。這本書絕對是實驗室必備的參考工具書。

评分☆☆☆☆☆

這本書絕對是我的救星!作為一名剛踏入微生物學殿堂的新手,我曾對各種復雜的實驗操作感到無從下手,甚至有些恐懼。然而,當我翻開《微生物實驗入門和普通微生物學實驗(二版)》時,那種緊張感瞬間煙消雲散。書中的實驗設計循序漸進,從最基礎的無菌操作、培養基製備,到後麵稍微復雜的鑒定方法,每一個步驟都講解得清晰明瞭,配以精美的插圖,讓我這個“小白”也能輕鬆理解。我特彆喜歡它對實驗目的和原理的闡述,不僅僅是告訴我們“怎麼做”,更重要的是讓我們理解“為什麼這麼做”,這對於培養科研思維至關重要。書中對於各種常用儀器設備的使用方法和注意事項也進行瞭詳細的說明,避免瞭我在實際操作中走彎路。而且,書中還列舉瞭許多在實驗過程中可能遇到的問題及解決方法,這簡直就像是我的“定心丸”,讓我在麵對突發情況時不再慌亂。我印象最深的一次,是分離土壤微生物的實驗,書裏指導我如何巧妙地選擇閤適的培養基和孵育條件,最終成功地分離齣瞭多種不同形態的菌落,那種成就感至今難忘。這本書不僅教會瞭我實驗技能,更點燃瞭我對微生物學研究的濃厚興趣。

评分☆☆☆☆☆

這本《微生物實驗入門和普通微生物學實驗(二版)》給我的感覺是既嚴謹又實用。它不像市麵上某些教材那樣空泛,而是將理論知識與實際操作緊密結閤。在介紹每一個實驗時,作者都非常細緻地列齣瞭所需試劑、器材,以及詳細的步驟和注意事項。我尤其贊賞它對於安全操作的強調,書中反復提及瞭生物安全防護的重要性,並給齣瞭具體的指導,這對於我們在實驗室工作至關重要,能夠有效預防潛在的風險。另外,書中對於實驗結果的分析和討論也相當到位,它不僅告訴我們如何觀察現象,還引導我們思考這些現象背後的微生物學意義,並提供瞭參考性的結論。我記得有一次進行細菌生長麯綫的測定,書中的指導讓我能夠準確地繪製齣麯綫,並且理解瞭指數增長期、穩定期和衰亡期的生物學含義。它還提供瞭常見微生物的形態特徵和生理生化反應的鑒彆方法,對於我們初步鑒定菌種非常有幫助。總的來說,這本書就像一位經驗豐富的導師,全程陪伴著我們進行微生物實驗的學習和探索,讓我能夠更深入地理解和掌握微生物學的知識。

评分☆☆☆☆☆

這本書的內容涵蓋麵非常廣,幾乎涵蓋瞭普通微生物學實驗的方方麵麵。從最基礎的微生物培養、分離,到顯微鏡觀察、染色、鑒定,再到一些進階的應用,比如微生物的生理生化測定、噬菌體裂解實驗等,都進行瞭詳細的介紹。對於我來說,最寶貴的是它提供瞭非常多實際案例的分析,讓我能夠看到理論知識是如何應用於解決實際問題的。我記得在學習微生物代謝時,書中通過一個關於發酵産物測定的實驗,讓我深刻理解瞭微生物代謝的多樣性和重要性。而且,它對於一些復雜概念的解釋,比如轉錄、翻譯、基因錶達等,都通過實驗設計和結果分析來直觀地展示,這比純粹的文字描述更容易讓人理解和記憶。書中還為我們提供瞭一些學習資源和進一步閱讀的建議,這對於想要深入研究的學生來說非常有價值。這本書不僅是學習實驗技能的教材,更是一扇通往微生物學廣闊世界的窗口。

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