基礎微生物實驗(修訂版)

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圖書描述

精密科學的基石:現代生物技術與分子生物學核心技術指南 書籍簡介 本書匯集瞭生命科學領域最前沿、最核心的實驗技術和操作規範,旨在為高等院校生命科學、生物技術、藥學、醫學預科等專業的師生及科研人員提供一本全麵、深入且具備高度實操性的參考手冊。本書的編寫遵循瞭從基礎理論到高級應用的邏輯遞進原則,確保讀者能夠係統地構建起實驗技能的知識體係。 本書內容廣泛,涵蓋瞭分子生物學、細胞生物學、生物化學、蛋白質組學、基因組學等多個交叉學科的必備技術。我們著重強調實驗設計的嚴謹性、操作的精確性以及結果分析的科學性,力求將復雜的實驗流程以清晰、易懂的方式呈現齣來。 第一部分:分子生物學基礎技術精要 本部分是整個實驗技術體係的基石,詳細闡述瞭核酸(DNA和RNA)的提取、修飾、檢測與分析的各項關鍵步驟。 第一章:核酸的獲取與純化 本章深入探討瞭從不同來源(如細菌、酵母、植物組織、動物細胞及體液樣本)中提取高質量核酸的方法。重點介紹瞭基於酚氯仿抽提法的原理及其在保證核酸完整性上的優化技巧。同時,詳細對比瞭商業化矽膠柱快速提取法的操作流程、影響迴收率的關鍵因素(如裂解液的配方、洗脫液的pH值),並對提取後核酸的定量和定性評估方法(如Nanodrop、紫外分光光度法及瓊脂糖凝膠電泳分析)進行瞭詳盡的圖解說明。特彆關注瞭RNA提取過程中對RNase汙染的控製策略。 第二章:聚閤酶鏈式反應(PCR)及其衍生技術 PCR技術作為現代生物學研究的“發動機”,其原理和應用在此章節得到全麵解析。我們不僅詳細介紹瞭標準PCR的反應體係組分(Taq酶的選擇、引物設計原則、熱循環參數的優化),還拓展講解瞭多種高級應用: 定量實時熒光PCR(qPCR): 闡述瞭熒光染料法(如SYBR Green)和TaqMan探針法的原理差異、標準麯綫的建立與驗證,以及如何精確計算基因的相對或絕對錶達量。 反轉錄PCR(RT-PCR): 專注於cDNA的閤成條件優化,以及一步法與兩步法的適用場景對比。 高保真PCR與長片段擴增: 討論瞭特定酶(如Pfu、Q5)在提高保真度和擴增復雜模闆時的應用。 第三章:凝膠電泳與核酸分離純化 本章聚焦於核酸的物理分離技術。對瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)的製備濃度選擇、電泳緩衝液的配製進行瞭細緻的指導。對於DNA片段的分離,詳細描述瞭如何根據片段大小選擇閤適的電壓和電泳時間,以及從凝膠中切膠迴收目標片段的具體步驟和注意事項。同時,對限製性內切酶的酶切反應條件(如酶切位點識彆、溫度依賴性、酶的兼容性)進行瞭係統的錶格化總結。 第四章:基因剋隆與載體構建 基因剋隆是分子生物學的核心技能。本章詳細介紹瞭常用載體(如質粒、噬菌體載體)的選擇標準,包括抗性標記、復製起點和多剋隆抗性位點(MCS)的功能。重點講解瞭經典粘性末端連接法和現代高效連接技術,如T4 DNA連接酶的使用技巧。此外,還引入瞭更現代的重組技術,如Gateway剋隆係統和Gibson裝配技術,為復雜基因組編輯和錶達載體構建提供理論支持。 第二部分:蛋白質組學與免疫學實驗技術 本部分側重於蛋白質的製備、分離、鑒定及其在免疫學研究中的應用。 第五章:蛋白質的提取、定量與初步分離 蛋白質的提取往往受製於細胞類型和細胞壁的復雜性。本章提供瞭針對不同生物材料的優化裂解方案,包括機械破碎法、溫和去垢劑裂解法(如RIPA緩衝液)和強力變性裂解法。詳細介紹瞭常用的蛋白質定量方法,如Bradford法、Lowry法和BCA法,並分析瞭它們在不同乾擾物存在下的適用性。初步分離技術包括等電聚焦(IEF)的原理和操作。 第六章:蛋白質的高效分離與鑒定 聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是蛋白質分離的基礎。本章詳細指導瞭凝膠的配製、上樣技術、電泳參數控製以及染色方法(如考馬斯亮藍、銀染)。在此基礎上,深度解析瞭蛋白質印跡技術(Western Blotting):抗體的選擇與稀釋、封閉條件、一抗/二抗的孵育優化,以及化學發光和酶聯比色法的信號檢測。對於蛋白質質譜分析的樣品準備流程,也進行瞭入門級的介紹。 第七章:細胞培養與無菌操作規範 細胞培養是許多生物學研究的前提。本章嚴格遵循無菌操作規範,強調瞭生物安全櫃(BSC)的正確使用方法和維護保養。內容涵蓋瞭原代細胞、傳代細胞係(如293T, HeLa, CHO)的培養基配方、血清的篩選與添加、細胞傳代的技術要點(如消化液的選擇與用量、細胞計數方法)。此外,還包括瞭細胞活力測定(如MTT/CCK-8法)和冷凍保存復蘇的技術細節。 第八章:細胞生物學核心分析技術 本章介紹瞭觀察和分析細胞形態與功能的關鍵技術。 細胞固定與通透化: 詳細對比瞭甲醇、多聚甲醛(PFA)和Triton X-100在不同實驗目的下的應用效果。 免疫熒光染色(IF): 講解瞭多重熒光標記的染色順序、抗體兼容性、抗體孵育的優化,以及熒光顯微鏡的使用和圖像采集標準。 流式細胞術基礎: 介紹瞭流式細胞儀的基本構造、熒光通道的設置、補償(Compensation)的概念,以及如何通過細胞群體的散射光(FSC/SSC)和熒光信號進行細胞凋亡檢測或特定標誌物分析。 第三部分:生物安全性與數據管理 第九章:生物安全與廢棄物處理 嚴格遵守實驗安全規範是科研工作者不可推卸的責任。本章係統闡述瞭生物安全等級(BSL-1至BSL-4)的劃分標準、個人防護裝備(PPE)的正確穿戴流程,以及針對生物性、化學性、放射性廢棄物的分類、滅活與安全處置流程。特彆強調瞭高緻病性病原體操作的SOP。 第十章:實驗數據管理與結果的統計學分析 高質量的實驗必須伴隨嚴謹的數據處理。本章指導讀者如何建立規範的電子實驗記錄本(ELN),確保數據的可追溯性和可重復性。內容涵蓋瞭科研數據的備份策略、基本圖錶製作規範(如Origin、GraphPad Prism的使用指導),以及基礎的統計學方法應用,如t檢驗、方差分析(ANOVA)和非參數檢驗的選擇準則,確保實驗結論具有統計學意義。 本書的編寫風格力求嚴謹而不失實用性,注重對“為什麼做”與“如何做得更好”的深入探討,為生命科學研究者搭建起一座堅實的實踐橋梁。

著者信息

圖書目錄

圖書序言

圖書試讀

用户评价

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我不是學微生物的,但因為傢裡長輩曾經做過水產養殖,所以偶爾會聽到他們談論到水質的監測,以及各種水體中的微生物對養殖成功與否的影響。那時候就對微生物的世界感到好奇,覺得這些看不見的小生命,竟然能有這麼大的影響力。現在看到這本《基礎微生物實驗(修訂版)》,覺得非常貼切。雖然我不是專業人士,但有時候會想自己動手做一些簡單的實驗,來瞭解身邊的環境。例如,傢裡的飲用水,或者一些培養植物的土壤,裡麵到底有哪些微生物,它們又是如何影響我們生活的。這本書的「基礎」兩字,聽起來就非常適閤初學者,能夠幫助我們建立起基本的概念和操作方法。我特別希望能看到書中對於一些生活化的應用案例有更詳細的介紹,比如如何在傢裡簡單的檢測自來水中的菌落數,或者如何培養一些有益的微生物,像是在製作優格、泡菜時的菌種應用。如果能有一些圖文並茂的指導,並且詳細解釋各種實驗步驟背後的原理,那對於像我這樣非專業背景的讀者來說,會更加容易理解和上手。

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身為一個對食安問題高度關注的消費者,我常常會思考,我們餐桌上的食物,從農場到餐桌,經歷瞭哪些微生物的考驗。這也讓我對微生物實驗產生瞭濃厚的興趣。看到這本《基礎微生物實驗(修訂版)》,我感覺它就像是一本指南,能夠帶我走進微生物的世界。我還記得,有一次在新聞上看到關於某個食品被檢齣大腸桿菌超標的報導,那時候就對大腸桿菌這個名詞印象深刻,也開始好奇,它是怎麼被檢測齣來的,以及它對人體有什麼影響。這本書的「基礎」兩字,讓我感到安心,因為我不需要具備深厚的專業知識,就能夠開始學習。我特別希望能看到書中對於食品微生物的檢測方法有更詳細的介紹,例如如何檢測沙門氏菌、金黃色葡萄球菌等常見的食源性緻病菌。如果能有一些關於如何在傢裡進行簡單的食品微生物檢測的指導,那就更棒瞭。我相信,透過這本書,我能夠更清楚地瞭解,如何透過科學的實驗方法,來保障我們飲食的安全。

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身為一個曾經在生技公司待過幾年的人,我對「基礎微生物實驗」這個領域算是頗有體會。當年為瞭開發新產品,每天麵對的都是各式各樣的菌株,從原料的品質檢驗,到發酵過程的監控,微生物實驗可說是貫穿整個流程的關鍵。這本書的齣現,雖然我還沒機會翻閱,但光是看書名,就足以讓我想起當時在實驗室裡奮鬥的點滴。我還記得有一次,為瞭分離某種特定的酵母菌,我們花瞭將近一個月的時間,嘗試瞭各種培養基和分離方法,期間經歷無數次的失敗,連實驗室裡的學長姐都快要放棄瞭,最後卻因為一個微小的操作調整,成功分離齣瞭目標菌株,那種喜悅感,真的無法言語。所以,我特別期待這本《基礎微生物實驗(修訂版)》能夠涵蓋到一些實際應用上的操作技巧,而不僅僅是課本上的理論。例如,在菌種保存、無菌操作的要領、以及常見實驗結果的判讀方麵,如果能有更深入的指導,那對於正在學習或從事相關行業的朋友來說,將會非常有價值。畢竟,理論知識固然重要,但實際操作的經驗和技巧,纔是將理論付諸實踐的關鍵。希望這本書能在這些方麵給予讀者實質性的幫助,讓大傢在實驗室裡少走一些彎路。

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最近因為開始接觸一些關於水資源保護的議題,發現微生物在水體淨化過程中扮演著非常重要的角色。這也讓我對微生物實驗產生瞭濃厚的興趣。看到這本《基礎微生物實驗(修訂版)》,我感覺它就像是一本入門書,能夠引導我進入微生物的世界。我還記得,有一次在看紀錄片的時候,看到科學傢們在實驗室裡,透過各種儀器來分析水質,其中就包括對水中微生物的檢測。那時候我就在想,這些肉眼看不見的小生命,竟然能有這麼大的力量,來影響我們賴以生存的水資源。這本書的「基礎」兩字,讓我感到非常親切,因為我需要的是一本能夠讓我從頭開始學起的教材。我特別希望能看到書中對於水體微生物的介紹,以及如何進行簡單的水體微生物檢測。例如,如何培養水中的細菌和藻類,以及如何利用顯微鏡觀察它們的形態。如果能有一些關於如何透過微生物來淨化水質的原理介紹,例如利用厭氧菌或好氧菌來分解汙染物,那就更好瞭。我相信,透過這本書,我能夠更深入地瞭解微生物與水資源之間的關係,進而為保護我們的水資源盡一份心力。

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哇,看到這本《基礎微生物實驗(修訂版)》的書名,腦海裡瞬間湧現瞭好多大學時期的迴憶啊!還記得當年為瞭期末微生物實驗報告,常常在實驗室待到天黑,各種培養皿、顯微鏡、滅菌鍋,還有那股淡淡的消毒水味,至今都還清晰地烙在腦海裡。這本書的齣現,感覺就像是把那段青澀又充滿挑戰的時光重新拉迴眼前,讓我這個早已脫離實驗室許久的老屁股,也忍不住想迴味一下。雖然我現在的工作跟實驗已經沒什麼直接關係瞭,但迴想起當年學習微生物學的基礎知識,對理解很多生物現象,甚至是一些日常的衛生常識,都非常有幫助。尤其是在這個後疫情時代,大傢對病毒、細菌的關注度更高瞭,感覺有這麼一本紮實的基礎實驗書,對於想要深入瞭解微生物世界的朋友來說,絕對是個不錯的敲門磚。我個人在大學時期,對各種微生物的分離、培養、鑑定操作一直都覺得很有趣,雖然有時候會遇到一些實驗失敗的挫摺,但從失敗中學習、調整,最終看到菌落生長的那種成就感,是任何其他事情都無法取代的。這本書的「基礎」兩字,聽起來就讓人感到踏實,希望它能引導更多對微生物學充滿好奇的學子,踏上這趟奇妙的探索之旅。

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最近因為工作上的需要,常常需要接觸到一些關於食品安全、環境監測的報告,裡麵經常會提到各種微生物的檢測和分析。這讓我不禁迴想起大學時修習微生物學的課程,那時候覺得各種培養皿裡的斑斕色彩,就像是微觀世界的藝術品,而顯微鏡下的生命形態,更是充滿瞭奇幻的魅力。如今看到這本《基礎微生物實驗(修訂版)》,讓我對這個領域又燃起瞭興趣。我記得當年最喜歡做的實驗之一,就是用各種染色劑來觀察細菌的不同形態,像是革蘭氏陽性菌和陰性菌的區別,還有一些鞭毛、莢膜的觀察,每次都覺得很神奇,彷彿窺見瞭另一個平行世界。這本書的「修訂版」聽起來就很有吸引力,錶示它應該是根據最新的實驗技術和觀念進行瞭更新,這對於想要跟上時代步伐的讀者來說,絕對是一大福音。我特別希望能看到書中對於實驗安全、廢棄物處理的規範有詳細的說明,這在微生物實驗中是非常重要的一環,也是一個專業實驗人員的基本素養。另外,如果能包含一些常見實驗儀器的使用說明和維護保養的知識,那就更完美瞭,畢竟很多儀器操作不當,不僅會影響實驗結果,還可能造成危險。

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身為一位對生物科技產業充滿憧憬的大學生,我對實驗室裡的各種操作一直都抱持著高度的興趣。微生物實驗更是我最期待的課程之一,因為我深信,在這個微觀世界裡,蘊藏著無限的可能,從新藥開發到環境保護,微生物都扮演著不可或缺的角色。這本《基礎微生物實驗(修訂版)》的齣現,無疑是為我打開瞭一扇通往知識殿堂的大門。我還記得在第一次的微生物實驗課上,老師嚮我們展示瞭不同細菌在培養皿上的生長形態,那種充滿生命力的錶現,讓我驚嘆不已。我特別希望能看到這本書在實驗方法的介紹上,能夠更加細緻和清晰,例如對於培養基的配製、滅菌的原理、以及接菌操作的技巧,都希望能有詳細的圖解和步驟說明。畢竟,實驗的成功與否,很大程度上取決於這些基礎操作的準確性。此外,如果書中還能包含一些常見微生物的特性介紹,以及如何利用這些特性來進行實驗設計,那就更棒瞭。我希望透過這本書,能夠紮實地打好微生物實驗的基礎,為我未來在生物科技領域的學習和研究,奠定堅實的基礎。

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我是一個喜歡動手做各種東西的人,從烘焙到手工藝,都樂在其中。最近,我對發酵食物產生瞭濃厚的興趣,像是製作優格、泡菜、甚至釀造一些簡單的飲品。我知道,發酵的過程離不開微生物的參與,這也讓我對微生物實驗的世界感到好奇。看到這本《基礎微生物實驗(修訂版)》,我感覺它就像是一本教科書,能夠幫助我瞭解發酵背後的科學原理。我還記得,有一次我嘗試自己製作優格,結果卻沒有成功,當時我就在想,是不是我的菌種齣瞭問題,或者是在操作過程中,有哪些環節沒有注意好。這本書的「基礎」兩字,讓我感覺很親切,因為我需要的是一本能夠讓我從頭開始學起的教材。我特別希望能看到書中對於不同發酵菌種的介紹,以及它們在發酵過程中所扮演的角色。如果能有一些關於如何培養和保存發酵菌種的技巧,以及如何透過實驗來優化發酵過程的建議,那就更好瞭。我相信,透過這本書,我能夠更深入地瞭解發酵的奧秘,進而做齣更美味、更健康的發酵食物。

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我是一位熱衷於園藝的朋友,常常會接觸到土壤、植物的健康問題。有時候,植物的生長狀況不佳,或是齣現一些奇怪的病徵,我都會懷疑是否跟土壤裡的微生物有關。這也讓我對微生物的世界產生瞭濃厚的興趣。看到這本《基礎微生物實驗(修訂版)》,就覺得它非常適閤像我這樣,想要從基礎層麵瞭解微生物的朋友。我還記得,有一次我在處理一些病葉的時候,感覺好像看到瞭葉片上有一些微小的斑點,那時候就覺得,是不是有什麼肉眼看不見的微生物在作祟。這本書的「基礎」二字,讓我感覺很親切,因為我需要的是一本能夠讓我從頭開始學起的教材。我特別希望能看到書中對於土壤微生物的介紹,以及如何進行簡單的土壤微生物檢測。例如,如何培養土壤中的細菌和真菌,以及如何利用顯微鏡觀察它們的形態。如果能有一些關於如何改善土壤微生物環境的建議,例如如何利用堆肥、或是添加一些有益菌種來促進植物生長,那就更好瞭。我相信,透過這本書,我能夠更深入地瞭解植物與微生物之間的奧秘,進而更好地照料我的植物。

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我是一個喜歡閱讀各式各樣書籍的人,對於科學類的書籍尤其情有獨鍾。最近,我對微生物這個領域產生瞭濃厚的興趣,因為我發現,微生物無所不在,從我們的身體內部,到周遭的環境,都充滿瞭各種微生物。看到這本《基礎微生物實驗(修訂版)》,我感覺它就像是一本知識的寶庫,能夠帶我深入瞭解微生物的世界。我還記得,有一次在閱讀一篇關於人體腸道菌群的文章時,對其中提到的各種益生菌和緻病菌,以及它們對人體健康的重要性,感到非常驚訝。這本書的「基礎」兩字,讓我感到非常吸引,因為我需要的是一本能夠讓我從頭開始學起的教材。我特別希望能看到書中對於微生物的分類、結構、以及它們的生命活動有更詳細的介紹。如果能有一些關於常見微生物的實驗操作,例如如何分離、培養、以及鑑定微生物,那就更好瞭。我相信,透過這本書,我能夠更全麵地認識微生物,並對這個充滿生機的微觀世界,有更深入的理解。

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